分配色譜法

　　這種色譜的流動(dòng)相和固定相都是液體，樣品分子在兩個(gè)液相之間很快達(dá)到平衡分布。這種分離類似于萃取過(guò)程，是利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

　　常用的固定劑有β，β’-雙氧(ODPN)、聚乙二醇(PEG400~4000)、三亞甲基二醇(TMG)和角鯊?fù)?SQ)。使用與氣相色譜相同的方法，將固定液涂在多孔載體表面，但在使用中容易流失。目前，鍵合固定相被廣泛應(yīng)用。在這種固相中，固定液沒(méi)有涂覆在載體的表面上，而是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)將有機(jī)基團(tuán)結(jié)合到純硅膠顆粒的表面上。

　　例如，可以通過(guò)氯十八烷基硅烷和硅膠表面上的羥基(-OH)之間的反應(yīng)形成烷基化表面。這種固定液的優(yōu)點(diǎn)是不容易被流動(dòng)相侵蝕。在分配色譜中，流動(dòng)相可以是純?nèi)軇?，也可以用混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫，其極性應(yīng)與固定液不同，以避免兩者之間的相容性。

　　液相色譜所用的基本理論:塔盤(pán)理論和速率方程與氣相色譜基本相同，但由于氣相色譜是用液體代替氣體作為流動(dòng)相，所以液體和氣體的性質(zhì)是不同的。

　　液相色譜中使用的保留值、塔板數(shù)、塔板高度、分離度和選擇性等基本概念與氣相色譜中使用的基本概念一致。

　　高效液相色譜儀的構(gòu)建

　　高效液相色譜系統(tǒng)主要由流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和記錄器組成。其整體組成與氣相色譜相似，但根據(jù)流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)做了很多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定穩(wěn)定，采樣系統(tǒng)要求采樣方便，切換嚴(yán)格。同時(shí)，由于液體流動(dòng)相的粘度遠(yuǎn)高于氣體，為了降低柱壓，HPLC的色譜柱一般較粗，長(zhǎng)度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。