1.盡量慢一點(diǎn)。
當(dāng)我們使用固相萃取器時(shí),我們面臨一個(gè)問題:液體應(yīng)該以什么樣的速度流出柱子?我的經(jīng)驗(yàn)是,要想取得好的效果,就要盡量慢。。
對于固相萃取儀的柱內(nèi)填料,如果局部看,放大看,其實(shí)有很多空間和很多通道供液體流通。如果流動(dòng)速度很快,待檢測成分中的相當(dāng)一部分將在與填料充分相互作用之前從通道中流失。所以慢下來,給他們一個(gè)充分的機(jī)會。
有多慢?一招是不用所謂的固相萃取儀配合抽氣器,而是用重力法。利用重力使液體向下流動(dòng)。就實(shí)驗(yàn)速度而言,重力法遠(yuǎn)不如吸力法,但就實(shí)驗(yàn)效果而言,重力法遠(yuǎn)優(yōu)于吸力法。抽吸法只能獲得條帶吸附,重力法可以獲得柱頭吸附。在速度和效果的平衡上,我們還是傾向于優(yōu)先保證好的效果。
舉個(gè)例子,如果在一個(gè)3ml500mg的C18柱中加入甲醇進(jìn)行活化,甲醇全部流到篩板需要20分鐘左右,而通過樣品溶液時(shí),需要25ml液體* 2個(gè)多小時(shí)才能流出來,如果重力法使用得當(dāng),工作率并不比抽吸法差多少。因?yàn)榭梢猿浞掷米约旱目臻e時(shí)間,吸引法需要有人在旁邊等著,而重力法因?yàn)椴恍枰?,可以充分利用午休和晚上的時(shí)間通過柱子。當(dāng)液體體積較大時(shí),只需連接一個(gè)疊加接頭和一個(gè)延長管,安排好實(shí)驗(yàn)步驟,工作效率同樣較高。另外,重力法不需要抽氣器和固相萃取儀。
2.越少越好。
在固相萃取儀的條件選擇上,有些人為了提高萃取效率,盡量多加液體或者選擇填料量大的小柱,我覺得是很不一樣的。尤其是用重力法的時(shí)候,因?yàn)樾矢?,很多時(shí)候是柱頭吸附,并不是所有的填料都在起作用。填料越多,不僅液體流出速度會越慢,洗脫時(shí)擴(kuò)散也越明顯。
所以n. com建議,夠用就行,在能保證效率的情況下,填料盡量少,液體不要加太多。
3.實(shí)驗(yàn)條件不要太詳細(xì)。
固相萃取器原理上是色譜分離,但在操作上只是作為吸附萃取劑使用。由于填料的性質(zhì)和緊密程度不同,在實(shí)際實(shí)驗(yàn)中,由于追求最佳效果,沒有必要設(shè)計(jì)復(fù)雜的洗脫程序。
在建立條件上,要充分利用現(xiàn)有資料,盡快建立系統(tǒng),同時(shí)要警惕操作過于復(fù)雜的步驟,在實(shí)驗(yàn)效果、實(shí)驗(yàn)速度和可操作性之間取得平衡。
只使用一次
固相萃取柱只使用一次。因?yàn)閲?yán)格意義上來說,很多物質(zhì)的吸附是不可逆的,第一次吸附無法洗脫,影響下一次吸附。雖然有人做過重復(fù)使用的實(shí)驗(yàn),但是為了節(jié)省一些資金而大幅增加結(jié)果的不可靠性和不確定性,是非常不劃算的。