色譜分析的樣品制備是一個重要而復(fù)雜的過程，因為色譜分析技術(shù)涉及的樣品種類繁多，樣品的成分和濃度復(fù)雜多變。樣品的物理形態(tài)繁多，用分析方法直接分析測定干擾因素多。因此，必須選擇和實施科學(xué)有效的處理方法和技術(shù)，以達(dá)到分析測定或評價調(diào)查的目的。現(xiàn)代色譜儀器對一個樣品進(jìn)行分析測定所需的時間越來越短，但色譜分析樣品制備過程所花費的時間仍然很長。據(jù)統(tǒng)計，在大多數(shù)色譜分析實驗中， 將一個原始樣品處理成可以直接用于色譜儀器分析測定的樣品狀態(tài)只需要總分析時間的60%-70%左右，而色譜儀器測定這個分析樣品只需要10%左右的時間，其余時間用于整理和報告這個樣品的測定結(jié)果。
2.樣品預(yù)處理過程
2.1預(yù)處理
將樣品粉碎、混合、收縮的過程稱為預(yù)處理。
固體樣品-低含水量，粉碎并過篩。將高含水量的可食用部分切碎或干燥，然后粉碎并過篩。
液體和泥漿-攪拌混合均勻
不相容液體-取樣前分開
特殊樣品-根據(jù)實驗要求進(jìn)行特殊處理
2.2提取
瀝濾-將待檢測的成分轉(zhuǎn)移到固體樣品的提取液中。
萃取——對于液體樣品，利用組分在兩種不相容溶劑中的不同分配系數(shù)，將組分從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中，從而達(dá)到萃取的目的。
2.3凈化
去除雜質(zhì)的過程叫做提純。
提取方法-適用于液體樣品，少量多次。
化學(xué)法——通過化學(xué)反應(yīng)改變雜質(zhì)或待測物質(zhì)的溶解度，將其從原體系中分離出來。
色譜——利用不同的物理和化學(xué)性質(zhì)(如溶解度、吸附能力、電荷、分子量、分子親和力等)。)混合物中各組分，各組分在支架上的移動速度不同，集中在不同的區(qū)域，從而將各組分分離。
2.4濃度
提取純化后，樣品體積變大，分析物濃度降低，不利于檢測。因此，濃縮的目的是減少樣品體積，增加分析物的濃度。常見的方法如下:
大氣壓濃縮-適用于揮發(fā)性和沸點相對較低的組分。通過升高溫度，使溶劑由液態(tài)轉(zhuǎn)化為氣態(tài)并通過冷凝器抽走或再次收集，從而達(dá)到濃縮的目的。
減壓濃縮——抽真空在容器內(nèi)產(chǎn)生負(fù)壓，在不改變物質(zhì)化學(xué)性質(zhì)的情況下降低物質(zhì)的沸點，使一些高溫或高沸點下化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的溶劑在低溫下由液體轉(zhuǎn)化為氣體，通過冷凝器被抽走或再次收集。
冷凍干燥——冷凍的同時抽真空，使溶劑升華，適用于生物活性樣品。
氮氣吹掃濃縮-適用于少量揮發(fā)性提取物。用惰性氣體吹掃加熱后的樣品溶液，使待處理樣品快速濃縮，達(dá)到快速分離純化的效果。該方法操作簡單，尤其適用于同時處理多個樣品，大大縮短了檢測時間。廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測、制藥行業(yè)的樣品批量處理和一般研究。
2.5氮氣渦流吹掃技術(shù)
該裝置采用氮氣渦流旋轉(zhuǎn)吹掃技術(shù)，在一定溫度下用氮氣吹掃樣品，使待測物質(zhì)獲得良好的富集效果。濃縮器由微處理器控制，以確保樣品的自動濃縮和蒸發(fā)。氣體噴嘴吹出氮氣流在濃縮管內(nèi)形成螺旋氣流，減緩了氣流的沖力，使溶劑揮發(fā)均勻，不會飛濺。
2.6吹氮濃度的影響因素
適當(dāng)提高溫度可以提高目標(biāo)物質(zhì)的回收率。對于不同的物質(zhì)，可以通過設(shè)置濃縮器的參數(shù)來適當(dāng)控制濃縮時的溫度和壓力，以縮短濃縮時間，達(dá)到更好的回收。
2.6.1氮氣流動壓力對回收率的影響
旋渦吹氮濃縮器氮氣流量的變化是通過調(diào)節(jié)氮氣入口壓力來實現(xiàn)的，管徑不變，流量與壓力成正比。氮氣流的壓力越大，氮氣流的流速越大。氮氣流與試管壁碰撞形成渦流。溶劑的接觸表面積和渦流剪切力越大，溶劑蒸發(fā)越快。同時，可以通過不斷吹掃氮氣來避免溶劑和空氣之間的化學(xué)反應(yīng)。
2.6.2水浴溫度對氮氣流量的影響
將濃縮管浸入水浴中，通過傳熱控制濃縮管中溶液溫度。通常，水浴的溫度控制范圍為30℃至60℃。溫度設(shè)置取決于濃縮管中溶劑的沸點和分析物的性質(zhì)。水浴溫度一般低于溶劑的沸點溫度，否則蒸發(fā)速度可能過快，回收率可能降低。但溫度設(shè)置過低，濃縮時間過長，長時間氮氣吹掃也會導(dǎo)致待測物質(zhì)揮發(fā)。設(shè)定水浴溫度時，應(yīng)充分考慮溶劑的沸點和揮發(fā)性。高溫可以縮短濃縮時間，避免目標(biāo)物質(zhì)與空氣長期接觸， 并減少目標(biāo)物質(zhì)的揮發(fā)，但過高的溫度會導(dǎo)致溶劑的沸騰，從而降低回收率。
2.7氮氣鼓風(fēng)機(jī)
吹氮儀主要用于吹氮濃縮步驟，基本原理是與氮氣瓶相連，經(jīng)過減壓閥。
將氮氣通入吹氮儀的曝氣板上，然后對樣品進(jìn)行曝氣板上的吹氮。
吹掃以達(dá)到濃縮的目的，并在試管底部加熱以加速溶劑的蒸發(fā)。
蔬菜中26種農(nóng)藥殘留的前處理及檢測方法
建立了固相萃取-毛細(xì)管氣相色譜法快速測定蔬菜中26種有機(jī)磷、有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的方法。
1樣品制備
1.1提取
樣品用組織搗碎機(jī)勻漿，準(zhǔn)確稱取20g樣品，加入50 mL乙腈，在勻漿器中高速勻漿1 min，然后用濾紙過濾。將濾液收集在含有5-10 g氯化鈉的100 mL量筒中，收集濾液，蓋上塞子，劇烈搖動1 min，并在室溫下靜置30 min，以使乙腈相和水相明顯分離。
1.2樣品純化
1.2.1有機(jī)磷農(nóng)藥的提純
從100 mL帶塞量筒中吸取5.0 mL乙腈溶液，放入10 mL帶刻度的試管中，用氮氣鼓風(fēng)機(jī)濃縮至近干(50℃水浴)。將2.0 mL轉(zhuǎn)移到帶刻度的離心管中，在渦旋混合器中混合均勻，并提供給氣相色譜分析。
1.1.2有機(jī)氯和擬除蟲菊酯農(nóng)藥的提純
從100 mL有塞量筒中吸取10.0 mL乙腈溶液，置于10 mL刻度試管中，在氮氣鼓風(fēng)機(jī)上濃縮至近干(水浴溫度為50℃)，移去2.0 mL己烷溶解殘渣，在渦旋混合器中混合均勻，待凈化。
弗羅里硅土柱用5.0毫升正己烷(10: 90，v/v)和5.0毫升正己烷預(yù)處理。當(dāng)溶劑水平達(dá)到柱吸附層的表面時，立即加入樣品溶液，并用10 mL帶刻度的離心管收集洗脫液。用5 mL:正己烷(10: 90，v/v)洗滌帶刻度的離心管后，使其通過芙羅莉絲柱并重復(fù)一次。將離心管置于氮氣鼓風(fēng)機(jī)上，水浴溫度50℃，吹氮氣蒸發(fā)至小于4.0 mL，用正己烷定容至4.0 mL。在渦旋混合器中混合均勻后，用氣相色譜分析。
《動物性食品中多種殘留的前處理方法》( GB/T 21981-2008)
1導(dǎo)言
據(jù)相關(guān)報道，部分乳品廠可能經(jīng)不住利益誘惑，在奶牛患病或不孕的情況下，為了提高產(chǎn)奶量，盲目使用抗生素等違禁藥物。嬰兒食用奶粉后可能出現(xiàn)性早熟，對嬰兒造成嚴(yán)重傷害。
衛(wèi)生部委托北京市疾病預(yù)防控制中心、中國檢驗檢疫科學(xué)研究院等檢測機(jī)構(gòu)，采用國際通行的檢測方法(液相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜GB/T21981-2008)對多種奶粉進(jìn)行檢測。結(jié)果并未超標(biāo)，但人們對嬰幼兒的健康保護(hù)深感憂慮。很多家長都成了驚弓之鳥，不知道該給孩子買什么樣的奶粉。
2個樣品的制備
2.1動物肌肉、肝臟和蝦
從所有樣品中取出約500 g有代表性的樣品，去除筋膜，去除蝦頭和蝦殼。用組織搗碎機(jī)充分均勻搗碎，均勻分成兩份，分別裝入干凈的容器中，密封并做好標(biāo)記，在-18℃下冷凍。
2.2牛奶
從所有樣品中取約500g有代表性的樣品，搖勻，分成兩份，放入干凈的容器中，密封，做好標(biāo)記，置于0℃-4℃以下的冷庫中保存。
2.3雞蛋
從所有樣品中取出約500 g有代表性的樣品，除去外殼，用組織搗碎器攪拌均勻，分成兩份，放入干凈的容器中，密封，做好標(biāo)記，冷藏于0℃-4℃以下。注:在樣品制備過程中，必須防止樣品被污染或其中的殘留物發(fā)生變化。
3樣品提取和純化
3.1提取
稱取5g樣品(J = 0.01g)于50mL帶塞塑料離心管中，準(zhǔn)確加入100μL內(nèi)標(biāo)溶液(4.15)和10mL乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，渦旋混勻，然后加入100μLβ-醛縮酶溶液，在37±1℃振蕩酶解12h。冷卻至室溫，加入25毫升甲醇超聲提取30分鐘，在0℃ ~ 4℃下10000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移至干凈的燒杯中，加入100毫升水，混勻純化。
3.2凈化
提取物以2 ml/min ~ 3 ml/min的速度上樣于活化的ENVI-Carb相萃取柱上。將小柱減壓排空，然后將活化氨基柱串聯(lián)在ENVI-Carb固相萃取柱下方。用6mL二氯甲烷-甲醇溶液洗脫，收集洗脫液，取下色譜柱，用2mL二氯甲烷-甲醇溶液洗滌氨基柱，在弱氮氣流下干燥洗脫液，殘渣用1mL甲醇-水溶液溶解，用LC-MS/MS法測定。